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实验动物采血指南

一、采血方法的选择

决定于实验的目的所需血量以及动物种类

凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。

当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。

例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及n K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。

采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。

二、常用采血方法n

1、取少量血 a. 尾静脉                   大鼠、小鼠

b. 耳静脉                   兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 c. 眼底静脉丛               兔、大鼠、小鼠 d. 舌下静脉                兔 e. 腹壁静脉                青蛙、蟾蜍 f.  冠、脚蹼皮下静脉    鸡、鸭、鹅

2、取中量血 a.后肢外侧皮下小隐静脉           狗、猴、猫 b.前肢内侧皮下头静脉       狗、猴、猫 c.耳中央动脉                   兔 d.颈静脉                             狗、猫、兔 e.心脏                                 豚鼠、大鼠、小鼠 f.断头                                 大鼠、小鼠 g.翼下静脉                            鸡、鸭、鸽、鹅 h.颈动脉                                鸡、鸭、鸽、鹅

3、取大量血 a.股动脉、颈动脉   狗、猴、猫、兔 b.心脏        狗、猴、猫、兔 c.颈静脉               马、牛、山羊、绵羊 d.摘眼球               大鼠、小鼠

4、采血量的确定 nn 采动物品种  最大安全采血量(ml)    最小致死采血量(ml) 小 鼠          0.2        0.3 大 鼠         1           2 豚 鼠         5          10 兔            10          40 狼 狗         100        500 猎 狗          50         200 猴         15           60

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三、兔采血法

1\.耳静脉采血

本法为最常用的取血法之一,常作多次反复取血用,因此,保护耳缘静脉,防止发生栓塞特别重要。

将兔放入仅露出头部及两耳的固定盒中,或由助手以手扶住。 选耳静脉清晰的耳朵,将耳静脉部位的毛拔去,用75%酒精局部消毒,待干。 用手指轻轻摩擦兔耳,使静脉扩张,用连有5(1/2)号针头的注射器在耳缘静脉末端刺破血管。 待血液漏出取血或将针头逆血流方向刺入耳缘静脉取血,取血完毕用棉球压迫止血。 此种采血法一次最多可采血5-10ml。n

2\.耳中央动脉采血 n将兔置于兔固定筒内,在兔耳的中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉,用左手固定兔耳,右手取注射器, 在中央动脉的末端,沿着动脉平行地向心方向刺入动脉,即可见动脉血进入针筒,取血完毕后注意止血。 此法一次抽血可达15ml。 n注意事项有nn:①由于兔耳中央动脉容易发生痉挛性收缩,因此抽血前,必须先让兔耳充分充血,当动脉扩张,未发生痉挛性收缩之前立即进行抽血,如果等待时间过长,动脉经常会发生较长时间的痉挛性收缩。②取血用的针头一般用6号针头,不要太细。n③

针刺部位从中央动脉末端开始。n④

不要在近耳根部取血,因耳根部软组织厚,血管位置略深,易刺透血管造成皮下出血。n

3\.心脏取血

将家兔仰卧固定,在第三肋间胸骨左缘3毫米处注射针垂直刺入心脏,血液随即进入针管。 注意事项有:n①

动作宜迅速,以缩短在心脏内的留针时间和防止血液凝固;n②

如针头已进入心脏但抽不出血时,应将针头稍微后退一点。nn③

在胸腔内针头不应左右摆动以防止伤及心,肺、一次可取血20-25ml。

4\.后肢胫部皮下静脉取血 n将兔仰卧固定于兔固定板上,或由一人将兔固定好。 拔去胫部被毛,在胫部上端股部扎以橡皮管,则在胫部外侧浅表皮下,可清楚见到皮下静脉。 用左手两指固定好静脉,右手取带有5(1/2)号针头的注射器内皮下静脉平行方向刺入血管,抽一下针栓,如血进入注射器,表示针头已刺入血管,即可取血。一次可取2~5ml。 n注意事项有nn:取完后必须用棉球压迫取血部位止血,时间要略长些,因此处不易止血。如止血不妥,可造成皮下血肿,影响连续多次取血。n

5\.股静脉、颈静脉取血

先作股静脉和颈静脉暴露分离手术 ⑴股静脉取血

注射器平行于血管,从股静脉下端向心方向刺入,徐徐抽动针栓即可取血。 抽血完毕后要注意止血。股静脉较易止血,用于纱布轻压取血部位即可。若连续多次取血,取血部位宜尽量选择靠离心端。 n ⑵外颈静脉取血

注射器由近心端(距颈静脉分支2-3厘米处)向头侧端顺血管平等方向刺入,使注射针一直引深至颈静脉分支叉处,即可取血。 此处血管较粗,很容易取血,取血量也较多,一次可取10ml以上。取 血完毕,拔出针头,用干纱布轻轻压迫取血部位也易止血。 兔急性实验的静脉取血,用此法较方便。

四、大小鼠采血法

nn n1、割(剪)尾采血 n当所需血量很少时采用本法 固定动物并露出鼠尾。 将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。 再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取。 采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。 每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。

2\.鼠尾刺血法 n大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。 先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。 用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出。 如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。

3\.眼眶静脉丛采血

采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。 当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。 右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。 刺入深度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。 当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。 若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。

若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难,左右两眼轮换更好。 体重20-25g的小鼠每次可采血 n0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。

4\.断头取血 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。 右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。 小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。

5\.心脏采血

鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。 活体采血方法与豚鼠相同 。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。 小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。

6\.颈动静脉采血

先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。 在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。

7\.腹主动脉采血 最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。 用注射器吸出血液,防止溶血。 或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。

8\.股动(静)脉采血

先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。 或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。 体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。

五、狗 / 猫采血法

n 1.后肢外侧小隐静脉和前肢内侧下头静脉采血

此法最常用,且方便。 后肢外侧小隐静脉在后肢胫部下1/3的外侧浅表的皮下,由前侧方向后行走。 抽血前,将狗固定在狗架上或使狗侧卧,由助手将狗固定好。 将抽血部位的毛剪去,碘酒一酒精消毒皮肤。 采血者左手拇指和食指握紧剪毛区上部,使下肢静脉充盈,右手用连有6号或7号针头的消毒器迅速穿刺入静脉,左手放松将针固定,以适当速度抽血(以无气泡为宜)。 或将胶皮带绑在狗股部,或由助手握紧股部,即可,若仅需少量血液,可以不用注射器抽取,只需用针头直接刺入静脉,待血从针孔自然滴出,放入盛器或作涂片。

采集前肢内侧皮下的头静脉血时,操作方法基本与上述相同。 一只狗一般采10-20ml血并不困难。

2\.股动脉采血 n本法为采取狗动脉血最常用的方法。 操作也较简便。稍加以训练的狗,在清醒状态下将狗卧位固定于狗解剖台上。 伸展后肢向外伸直,暴露腹肥肉沟三角动脉搏动的部位,剪去毛。用碘酒消毒。 左手中指、食指探摸股动脉跳动部位,并固定好血管,右手取连有5(1/2)号针头的注射器,针头由动脉跳动处直接刺入血管,若刺入动脉一般可见鲜红血液流入注射器,有时还需微微转动一下针头或上下移动一下针头,方见鲜血流入。 有时,往往刺入静脉,必须重抽之。 待抽血完毕,迅速拔出针头,用干药棉压迫止血2~3分钟。

3\.心脏采血

本法最好在麻醉下进行,驯服的狗不麻醉也行。 将固定在手术台上,前肢向背侧方向固定,暴露胸部,将左侧第3-5肋间的被毛剪去,用碘酒-酒精消毒皮肤。 采血者用左手触摸左侧3-5肋间处,选择心跳最显处穿刺。 一般选择胸骨左缘外1cm第4肋间处。 取连有6(1/2)号针头的注射器,由上述部位进针,并向动物背侧方向垂直刺入心脏。 采血者可随针接触心跳的感觉,随时调整刺入方向和浓度,摆动的角度尽量小,避免损伤心肌过重,或造成胸腔大出血。 当针头正确刺入心脏时,血即可进入抽射器,可抽取多量血液。

4\.耳缘静脉采血

本法宜取少量血液作血常规或微量酶活力检查等。 有训练的狗不必绑嘴,剪去耳尖部短毛,即可见耳缘静脉,手法基本与兔相同。

n 5.颈静脉

狗不需麻醉,经训练的狗不需固定,未经训练的狗应予固定。 取侧卧位,剪去颈部被毛约10×3cm2范围,用碘酒、酒精消毒皮肤。 将狗颈部拉直,头尽量后抑。用左手拇指压住颈静脉入胸部位的皮肤,使颈静脉怒张,右手取连有6(1/2)号针头的注射器。 针头沿血管平行方向向心端刺往前血管。 由于此静脉在皮下易滑动,针刺时除用左手固定好血管外,刺入要准确。 取血后注意压迫止血。 采用此法一次可取较多量的血。

猫的采血法基本与狗相同。常采用前肢皮下头静脉、后肢的股静脉、耳缘静脉取血。需大量血液时可从颈静脉取血。方法见前述。

六、猴采血法

与人类的采血法相似,常用者有以下几种:

1\.毛细血管采血 需血量少时,可在猴拇指或足跟等处采血。采血方法与人的手指或耳垂处的采血法相同。

n 2.静脉采血

最宜部位是后肢皮下静脉及外颈静脉。后肢皮下静脉的取血法与狗相似。 n用外颈静脉采血时,把猴固定在猴台上,侧卧,头部略低于台面,助手固定猴的头部与肩部。先剪去颈部的毛,用碘酒-酒精消毒,即可见位于上颌角与锁骨中点之间的怒张的外颈静脉。 用左手拇指按住静脉,右手持连6(1/2)号针头的注射器,其它操作与人的静脉取血同。 n 也可在肘窝、腕骨、手背及足背选静脉采血。但这些静脉更细、易滑动、穿刺难,血流出速度慢。

3\.动脉采血

股动脉可触及。取血量多时常被优先选用,手法与狗股动脉采血相似。 此外,肱动脉与桡动脉也可用。

源自丁香园

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