无核酸酶水（Nuclease-free water）

Composition: 用于 qPCR 的无核酸酶水。
Formulation: 无核酸酶水。
Quality standard: 适用于正、反向引物稀释，要求无 DNase/RNase 活性且与 qPCR 体系兼容。
Use information: 用于将正、反向引物稀释至 5 µM。

Published protocol versions

cDNA 模板的实时定量 PCR（qPCR，SYBR Green 分支） · qPCR 反应体系 · 引物稀释按正反向引物储备液浓度配成 5 µM 工作液；源方案未列出储备浓度与加水量 · 无 DNase/RNase 活性的无核酸酶水，用于引物稀释和 qPCR 体系配制。
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RT-qPCR 通用
db/db (Lepr^db) · Verified applicability · 2型糖尿病 (T2D)（db/db 模型用于肥胖相关胰岛素抵抗和2型糖尿病研究，适用性受遗传背景影响。；Verified applicability） · 糖尿病肾病 (DN)（C57BLKS 背景 db/db 模型用于糖尿病肾病研究，仅部分重现人类疾病特征。；Verified applicability） · 代谢疾病（db/db 模型用于肥胖及代谢异常研究，适用性受遗传背景影响。；Verified applicability） · 糖尿病模型（db/db 模型用于糖尿病机制及干预研究；适用性依据为文献报道。；Verified applicability）
ApoE⁻⁻ 动脉粥样硬化模型 · Verified applicability · 动脉粥样硬化模型（ApoE 缺失模型用于高胆固醇血症及动脉粥样硬化病变研究。；Verified applicability） · 代谢疾病（ApoE⁻⁻ 代谢-动脉粥样硬化模型；Candidate (not internally validated)）
C57BL/6 MPTP 黑质纹状体变性参考模型（文献参考） · Verified applicability · 帕金森病 (PD)（MPTP 诱导黑质纹状体多巴胺能变性研究的文献参考模型；适用性限于化学诱导范式下的神经退行性表型与近交品系间反应比较；Verified applicability）
AOM/DSS 结肠炎相关结肠肿瘤模型（文献参考） · Verified applicability · 结直肠癌 (CRC)（炎症相关结肠肿瘤发生与预防干预研究的文献参考模型（AOM/DSS 范式）；Verified applicability）
OVA 致敏激发过敏性气道炎症模型（文献参考） · Verified applicability · 气道高反应性与哮喘（过敏性气道炎症机制与干预评价的文献参考模型（OVA 致敏/激发范式）；Verified applicability）
C57BL/6J · Verified applicability · 帕金森病 (PD)（C57BL/6J MPTP/6-OHDA 诱导 PD 模型背景品系；Candidate (not internally validated)）
脊髓挫伤损伤模型（小鼠，文献参考） · Verified applicability
LPS 相关急性肺部炎症模型（免疫研究参考） · Verified applicability
大鼠脑组织 Sirt1 转录本定量（cDNA qPCR） · 配制反应预混液 · 引物稀释用水用于配制 5 µM 引物工作混合液；加水量由引物储备液浓度确定 · 无核酸酶水，适用于 qPCR。
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实时定量 PCR（qPCR）
Wistar ICV-STZ rat · Verified applicability · 阿尔兹海默症 (AD) 模型（研究脑能量代谢、神经损伤与认知功能的联系，评估候选干预对相关表型的影响。；Verified applicability）
脑组织总 RNA 提取与柱上 DNA 去除 · 加入洗脱水 · RNA 洗脱 30 µl/样品 · 无 RNase 水。
Source version：protocols.io · vv1 · David A Bernlohr; Hector Martell Martinez · This is an open access protocol distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited
总 RNA 提取
Wistar ICV-STZ rat · Verified applicability · 阿尔兹海默症 (AD) 模型（研究脑能量代谢、神经损伤与认知功能的联系，评估候选干预对相关表型的影响。；Verified applicability）
脑组织 RNA 第一链 cDNA 合成 · 配制 RNA 与引物混合液 · 反应补水 RNA、引物与 dNTP 加入后补足至 12 µl · 无核酸酶水。
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反转录与 cDNA 合成
Wistar ICV-STZ rat · Verified applicability · 阿尔兹海默症 (AD) 模型（研究脑能量代谢、神经损伤与认知功能的联系，评估候选干预对相关表型的影响。；Verified applicability）

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