眼眶后静脉丛采血 · 实验方案
浏览实验方案适用范围与方法
样本:mouse blood
- CC 毒理多品系队列
- 组织
- blood
试剂与材料
实验流程
终末麻醉(达到并维持足够麻醉平面)
按本参考采用的NC3Rs框架,眼眶采血属终末/非恢复程序,须在有效全身麻醉下完成,而非轻度麻醉。小鼠吸入麻醉参考(Queen's SOP 7.6 Rev.5):异氟烷4–5%诱导;消失翻正反射、呼吸深慢后转鼻罩,1.5–2%维持,通过持续监测呼吸、反射等调整以维持足够手术麻醉平面。上述浓度为该来源的小鼠麻醉参考值,不来自NC3Rs,其恢复性护理环节不并入本终末采样框架。
眼眶静脉窦采血(终末、单次)
在终末麻醉与适当保定下,以玻璃毛细管或Pasteur移液管经毛细作用自眼眶静脉窦收集血液;每只动物仅一次采样。NC3Rs记载该技术的采样体积上限参考为0.5 mL/只,实际采集量按分析最小需求与动物状态确定,不设为所有小鼠统一的50–200 μL。注意:NC3Rs明确该样品为静脉血与组织液的混合,不能代表纯静脉血,PK分析解释时须计入此局限。抗凝或不加抗凝的选择按目标分析方法确定。
样品采集完成与终末处置
本框架下采血后不返笼恢复:采血完成即按经批准的动物使用/安乐死方案在麻醉下实施人道终点。样品即刻按时间点和动物编号规范标记,记录采集时间与状态,进入步骤4的后续处理。
血浆/血清分离与保存(按分析方法确定)
血清或血浆的制备与保存条件,包括抗凝或促凝选择、离心力与时间、温度及冻存条件,均按目标分析方法确定。本参考未指定药物与分析方法,相应参数保持未定;血清与血浆的处理条件不得互相套用。记录采样方式、采集和处理时间、样品基质及保存条件;按NC3Rs所述,本途径样品存在血液与组织液混合的局限。
终末采血的时间点分组设计
因每只动物仅能进行一次终末眼眶采血,PK曲线的每个时间点须使用不同动物;不沿用同一只小鼠短间隔2–3次大体积连续采血的设计。具体分组与各时间点应依据目标药物的吸收、分布、消除过程与分析方法拟定;不存在适用于所有药物的通用0–24 h时间表,本参考不提供预设时间点数值。
质量控制与输出
采用本参考的终末、非恢复框架,持续确认足够麻醉平面;记录动物编号、采集时间、采样量、样品基质及后续处理条件。采样量按分析需求与动物状态确定,毛细管具体产品适用性须经产品文件核对;眼眶样品混有组织液的局限须纳入后续分析解释。
形成有动物和时间点标识、采集及处理条件可追溯的终末血样。本参考未指定药物、检测方法或实际实验,不提供药代参数、分析性能或已执行实验结果;能否用于具体检测应由该分析方法的样品要求确定。
- 研究设计
- 有来源、范围限定的一条参考框架:小鼠终末性眼眶(retro-orbital)采血与血样交接。采用NC3Rs对眼眶采血的定位——仅限终末/非恢复程序,单次、单只一次;麻醉深度参考Queen's大学SOP 7.6(Revision 5,修订记录2025-08-13)的小鼠异氟烷吸入参数。不同机构SOP的恢复性多次采血框架与本参考不混写;本内容不代表公司全局动物政策,不是任何已执行PK实验的记录,也不声称本机构已验证该方案。血液处理条件与时间点分组须按具体药物与分析方法另行确定。
参考文献
- NC3Rs. Blood sampling: Mouse — Retro-orbital (terminal) section(2026-10-16实际取回). https://nc3rs.org.uk/3rs-resource-library/blood-sampling/blood-sampling-mouse
- Queen's University. SOP 7.6 — Anesthesia in Mice, Revision 5(修订记录2025-08-13). https://www.queensu.ca/animals-in-science/policies-procedures/sop/mice/7-6
- Mosedale M, Kim Y, Brock WJ, et al. Editor's Highlight: Candidate Risk Factors and Mechanisms for Tolvaptan-Induced Liver Injury Are Identified Using a Collaborative Cross Approach. Toxicol Sci. 2017;156(2):438-454. PMID 28115652, DOI 10.1093/toxsci/kfw269(仅作CC群体遗传背景参考,不证明眼眶采样方案已执行)