小鼠腹腔注射葡萄糖耐量检测(IPGTT)
浏览实验方案本方案给出小鼠腹腔注射葡萄糖耐量检测(IPGTT)的具体操作:实验前一周单笼饲养,称量体重,禁食6小时并测定基线血糖,按2 g/kg体重腹腔注射20% D-葡萄糖溶液,随后于注射后15至120分钟系列采血测定血糖。用于评估肥胖与糖代谢相关模型的葡萄糖清除能力。
适用范围与方法
样本:小鼠外周血(血糖测定)
- db/db (Lepr^db)
- 组织
- blood
- 饮食诱导肥胖(DIO)模型(文献参考)
- 组织
- blood
- CC G×E 多品系队列 (NZO 背景)
- 年龄
- 实验第6与第12周(该研究自8周龄起始)
- 性别
- 混合
- 组织
- blood
- ob/ob (Lep^ob)
- 年龄
- 5、10、20、40 周龄(来源研究的系列评定时点)
- 组织
- blood
- STZ 诱导糖尿病模型
- 性别
- 雄性
- 组织
- blood
- NOD 自发性1型糖尿病模型(文献参考)
- 年龄
- 6–14 周龄(来源研究的纵向评定时段)
- 性别
- 雌性
- 组织
- blood
试剂与材料
实验流程
提前一周单笼饲养
实验前一周将小鼠改为单笼饲养。
称量体重
逐只称量小鼠体重,用于按体重计算给糖体积。
禁食6小时
禁食六小时(06:00:00)。
测定基线血糖
禁食结束后,先用血糖仪测定血糖作为基线。
腹腔注射葡萄糖
按2 g/kg体重腹腔注射葡萄糖:将2 g D-葡萄糖溶于10 ml生理盐水配成20%葡萄糖贮备液,按每克体重10 ul给予。
系列采血测定血糖
于注射葡萄糖后15、30、45、60、90和120分钟采集血样,用血糖仪测定血糖。
质量控制与输出
负荷液须按源配方配制:2 g D-葡萄糖溶于10 mL生理盐水得20%(w/v),按每克体重10 µL给予以达到2 g/kg剂量。注射前须先测定基线血糖。采血时间点严格为注射后15、30、45、60、90和120分钟,并全程记录完整血糖-时间曲线。禁食时长(6小时)与检测时段应保持各受试对象一致。
以血糖浓度对时间作图得到完整血糖-时间曲线,并可计算曲线下面积(AUC)反映葡萄糖清除程度;当各受试对象基线血糖不同时应比较高于基线的幅度或曲线下面积,而非仅比较单一终点值。该检测反映葡萄糖负荷后的整体清除,不等同于胰岛素作用的直接测量。
参考文献
- Roberta Marongiu, Sabina Marciano. Glucose Tolerance Test, Version 2. protocols.io record 98408, 2024-04-18. https://doi.org/10.17504/protocols.io.261geddodv47/v2
- Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice. Disease Models & Mechanism (2010), PMID 20713647, DOI 10.1242/dmm.006239