Y 迷宫自发交替检测
Browse experimental protocolsThis protocol records 8 min of free exploration in a symmetrical Y-maze to measure spontaneous alternation as an index of working memory: mice acclimate in the behavior room for at least 01:00:00, are placed in the center of a maze cleaned with 70% ethanol and dried, and arm entries are video-tracked with EthoVision; percent alternation equals alternations over max entries, with a correlation check between entries or distance traveled and alternation to detect activity confounds.
Scope and method
Sample：活体小鼠,单次 8 min 自由探索行为记录;多台 Y 迷宫时同笼鼠可同时测试
- 5xFAD 转基因模型
- Age
- 2 月龄与 4-5 月龄(5xFAD Tg6799 自发交替行为表型的文献检测窗口)
- Tissue
- 活体小鼠,在体行为测定,工作记忆读出依赖海马功能
- APP/PS1 参考品系（B6;C3-Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo/Mmjax）
- Age
- 5月龄入组，干预10周后评价
- Sex
- Mixed
- Tissue
- 活体小鼠；APPswe/PS1dE9半合子，C57BL/6×C3H混合背景
Reagents and materials
Procedure
适应行为室
测试前将小鼠带入行为室,适应至少 01:00:00。
70% 乙醇清洁迷宫
每次测试前用 70% 乙醇清洁每个迷宫,晾干后再开始测试。
开始跟踪并放入迷宫中央
先启动 EthoVision 记录,再将动物放入迷宫中央;若有多台 Y 迷宫,同笼鼠可同时测试。
离开房间记录 8 分钟
实验者离开房间,记录 8 min 后将动物放回原饲养笼。
判定一次臂进入
当动物除尾部外全身进入臂内时,判定其进入了该臂。
界定自发交替与可能三连
百分比交替=自发交替次数/可能的三连总数。例如动物按 B、C、A、C、A、B 顺序进入臂时,计 2 次自发交替(BCA 与 CAB),可能三连共 4 个(BCA、CAC、ACA、CAB),即 50% 交替。
以跟踪软件读数计算百分比交替
EthoVision 报告交替次数与最大进入数,后者代表可能的三连数,百分比交替=交替次数/最大进入数;健康小鼠的百分比交替应约为 70%。
活动量混杂对照
对照检查:确认最大进入数或移动距离与百分比交替不相关;若两者存在相关,说明动物活动量使百分比交替判读失真,已不能准确反映工作记忆表现。
Quality control and readouts
每次测试前以 70% 乙醇清洁每个迷宫并晾干后方可开始;动物在行为室适应至少 01:00:00 后进入测试,记录期间实验者离开房间;进入判定以除尾部外全身入臂为准;当最大进入数或移动距离与百分比交替相关时,该次百分比交替不能准确反映工作记忆表现。
每只动物报告百分比自发交替(交替次数/最大进入数,即三连进入次数/可能的三连总数,单位%)、臂进入总次数与移动距离;百分比交替显著降低提示工作记忆受损,判读以活动量指标与交替率不相关为前提。健康小鼠的百分比交替约为 70%,臂进入次数与移动距离同时反映运动与探索活动水平。
References
- Blackmer-Raynolds L, Krout IN, Sampson T. Y-Maze Protocol. protocols.io v1, 2024-01-26. DOI:10.17504/protocols.io.eq2lyjr1mlx9/v1; 许可 Creative Commons Attribution (CC BY),要求署名原作者与出处。
- Oakley H, Cole SL, Logan S, et al. Intraneuronal beta-amyloid aggregates, neurodegeneration, and neuron loss in transgenic mice with five familial Alzheimer's disease mutations: potential factors in amyloid plaque formation. J Neurosci. 2006;26(40):10129-10140. DOI:10.1523/JNEUROSCI.1202-06.2006; PMID:17021169.(5xFAD Tg6799 自发交替测定:8 分钟自由探索、臂进入顺序与总次数记录、按基因型设盲,支持工作记忆判读与活动量对照的关系)
- Humulus japonicus inhibits the progression of Alzheimer's disease in a APP/PS1 transgenic mouse model. PMID:28004107; DOI:10.3892/ijmm.2016.2804. APPswe/PS1dE9 model–Y-maze applicability; original article10min, adopted protocols.io source8min; distinct reference implementations.