血样 ALT 活性测定(Teco A524 动力学法)
浏览实验方案使用 Teco A524 液态试剂,以 340 nm 下 NADH 吸光度下降速率定量血样 ALT 活性,用于反映肝细胞损伤。
适用范围与方法
样本:血清;GAN 小鼠研究采用血浆
alanine aminotransferase assay
- GAN 饮食相关 MASH 模型(文献参考)
- 年龄
- 8 周龄起喂饲 GAN 饮食(D09100310);约每 8 周眼眶取血纵向监测,观察期终点 32 周
- 性别
- 雄性
- 组织
- plasma(血浆)
试剂与材料
实验流程
配制工作试剂
将五份 R1 与一份 R2 混合配成工作试剂。
分装试剂
向标记好的样本管和质控管中各加入 1.0 mL 工作试剂。
预温
所有试管在 37°C 预温至少五分钟。
仪器调零
在 340 nm 下用蒸馏水将分光光度计调零。
加入样本
向对应试管加入 100 µL(0.10 mL)样本,轻轻混匀后转入恒温比色皿。
读取吸光度
在 1 min 读取吸光度;继续在 37°C 孵育,并在第 2 和第 3 分钟再次读取,确认变化速率恒定。
计算活性
求每分钟吸光度变化的平均值(ΔA/min),乘以 1768,得到 ALT 活性(U/L)。
逐样本检测
对每份样本重复上述检测;非恒温比色皿在各次读数间保持 37°C 孵育。
质量控制与输出
每批检测包含具有已知 ALT 活性的质控材料;工作试剂应澄清无色;核对吸光度随时间的变化速率。
ALT 活性,单位 U/L;比较同一检测体系下各组与时间点的变化。