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血样 ALT 活性测定(Teco A524 动力学法)

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使用 Teco A524 液态试剂,以 340 nm 下 NADH 吸光度下降速率定量血样 ALT 活性,用于反映肝细胞损伤。

适用范围与方法

样本:血清;GAN 小鼠研究采用血浆

alanine aminotransferase assay

试剂与材料

实验流程

  1. 配制工作试剂

    将五份 R1 与一份 R2 混合配成工作试剂。

  2. 分装试剂

    向标记好的样本管和质控管中各加入 1.0 mL 工作试剂。

  3. 预温

    所有试管在 37°C 预温至少五分钟。

  4. 仪器调零

    在 340 nm 下用蒸馏水将分光光度计调零。

  5. 加入样本

    向对应试管加入 100 µL(0.10 mL)样本,轻轻混匀后转入恒温比色皿。

  6. 读取吸光度

    在 1 min 读取吸光度;继续在 37°C 孵育,并在第 2 和第 3 分钟再次读取,确认变化速率恒定。

  7. 计算活性

    求每分钟吸光度变化的平均值(ΔA/min),乘以 1768,得到 ALT 活性(U/L)。

  8. 逐样本检测

    对每份样本重复上述检测;非恒温比色皿在各次读数间保持 37°C 孵育。

质量控制与输出

每批检测包含具有已知 ALT 活性的质控材料;工作试剂应澄清无色;核对吸光度随时间的变化速率。

ALT 活性,单位 U/L;比较同一检测体系下各组与时间点的变化。

参考文献

  1. Teco Diagnostics. ALT (SGPT) Liquid Reagent (Kinetic Method), A524. Revision 02/2018.
  2. Chan AP et al. Intestinal lipase inhibition uncouples diet-induced obesity from MASH by remodeling the hepatic lipidome in mice. J Lipid Res (2026), DOI 10.1016/j.jlr.2026.101112; PMID 42508572.

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