qPCR 正反向引物（5 µM）

组成

正向与反向寡核苷酸引物；具体靶基因和序列按各研究设计选定

配方

用无核酸酶水配制为 5 µM 工作浓度，正向与反向引物按源方案合并加入

浓度

5 µM

质量标准

正、反向引物与所选靶转录本匹配，适用于 SYBR Green 实时定量 PCR；工作液浓度为 5 µM。

使用说明

每 10 µL qPCR 反应加入 1 µL 5 µM 正反向引物混合液

已发布方案版本

• cDNA 模板的实时定量 PCR（qPCR，SYBR Green 分支） · qPCR 反应体系 · SYBR Green qPCR 扩增引物 1 µL/孔；正向与反向引物用无核酸酶水配成 5 µM 混合液 · 正反向引物按研究设计选定靶基因序列，用无核酸酶水稀释至 5 µM；与 PowerUp SYBR Green Master Mix 及 LightCycler 480 体系兼容，并通过熔解曲线和扩增效率验证。

  来源版本：protocols.io · vv1 · Miquel Vila · Creative Commons Attribution License (CC BY)

  RT-qPCR 通用
  db/db (Lepr^db) · 已验证适用 · 2型糖尿病 (T2D)（db/db 模型用于肥胖相关胰岛素抵抗和2型糖尿病研究，适用性受遗传背景影响。；已验证适用） · 糖尿病肾病 (DN)（C57BLKS 背景 db/db 模型用于糖尿病肾病研究，仅部分重现人类疾病特征。；已验证适用） · 代谢疾病（db/db 模型用于肥胖及代谢异常研究，适用性受遗传背景影响。；已验证适用） · 糖尿病模型（db/db 模型用于糖尿病机制及干预研究；适用性依据为文献报道。；已验证适用）
  ApoE⁻⁻ 动脉粥样硬化模型 · 已验证适用 · 动脉粥样硬化模型（ApoE 缺失模型用于高胆固醇血症及动脉粥样硬化病变研究。；已验证适用） · 代谢疾病（ApoE⁻⁻ 代谢-动脉粥样硬化模型；候选（未经吉田内部验证））
  C57BL/6 MPTP 黑质纹状体变性参考模型（文献参考） · 已验证适用 · 帕金森病 (PD)（MPTP 诱导黑质纹状体多巴胺能变性研究的文献参考模型；适用性限于化学诱导范式下的神经退行性表型与近交品系间反应比较；已验证适用）
  AOM/DSS 结肠炎相关结肠肿瘤模型（文献参考） · 已验证适用 · 结直肠癌 (CRC)（炎症相关结肠肿瘤发生与预防干预研究的文献参考模型（AOM/DSS 范式）；已验证适用）
  OVA 致敏激发过敏性气道炎症模型（文献参考） · 已验证适用 · 气道高反应性与哮喘（过敏性气道炎症机制与干预评价的文献参考模型（OVA 致敏/激发范式）；已验证适用）
  C57BL/6J · 已验证适用 · 帕金森病 (PD)（C57BL/6J MPTP/6-OHDA 诱导 PD 模型背景品系；候选（未经吉田内部验证））
  脊髓挫伤损伤模型（小鼠，文献参考） · 已验证适用
  LPS 相关急性肺部炎症模型（免疫研究参考） · 已验证适用