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小鼠腹腔注射葡萄糖耐量检测(IPGTT)

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Intraperitoneal glucose tolerance test (IPGTT) in mice: single-house for one week, weigh, fast for 6 hours, measure baseline glucose, inject 2 g/kg body weight of 20% D-glucose intraperitoneally, then collect blood at 15 to 120 minutes after injection. Used to assess glucose clearance in obesity and glucose-metabolism models.

Scope and method

Sample:小鼠外周血(血糖测定)

葡萄糖耐量试验

Reagents and materials

Procedure

  1. 提前一周单笼饲养

    实验前一周将小鼠改为单笼饲养。

  2. 称量体重

    逐只称量小鼠体重,用于按体重计算给糖体积。

  3. 禁食6小时

    禁食六小时(06:00:00)。

  4. 测定基线血糖

    禁食结束后,先用血糖仪测定血糖作为基线。

  5. 腹腔注射葡萄糖

    按2 g/kg体重腹腔注射葡萄糖:将2 g D-葡萄糖溶于10 ml生理盐水配成20%葡萄糖贮备液,按每克体重10 ul给予。

  6. 系列采血测定血糖

    于注射葡萄糖后15、30、45、60、90和120分钟采集血样,用血糖仪测定血糖。

Quality control and readouts

负荷液须按源配方配制:2 g D-葡萄糖溶于10 mL生理盐水得20%(w/v),按每克体重10 µL给予以达到2 g/kg剂量。注射前须先测定基线血糖。采血时间点严格为注射后15、30、45、60、90和120分钟,并全程记录完整血糖-时间曲线。禁食时长(6小时)与检测时段应保持各受试对象一致。

以血糖浓度对时间作图得到完整血糖-时间曲线,并可计算曲线下面积(AUC)反映葡萄糖清除程度;当各受试对象基线血糖不同时应比较高于基线的幅度或曲线下面积,而非仅比较单一终点值。该检测反映葡萄糖负荷后的整体清除,不等同于胰岛素作用的直接测量。

References

  1. Roberta Marongiu, Sabina Marciano. Glucose Tolerance Test, Version 2. protocols.io record 98408, 2024-04-18. https://doi.org/10.17504/protocols.io.261geddodv47/v2
  2. Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice. Disease Models & Mechanism (2010), PMID 20713647, DOI 10.1242/dmm.006239

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