小鼠腹腔注射葡萄糖耐量检测(IPGTT)
Browse experimental protocolsIntraperitoneal glucose tolerance test (IPGTT) in mice: single-house for one week, weigh, fast for 6 hours, measure baseline glucose, inject 2 g/kg body weight of 20% D-glucose intraperitoneally, then collect blood at 15 to 120 minutes after injection. Used to assess glucose clearance in obesity and glucose-metabolism models.
Scope and method
Sample:小鼠外周血(血糖测定)
- pancreas-specific Tcf7l2 knockout mouse (Pdx1-Cre)
- Age
- 20 周龄
- Tissue
- blood
- NOD 自发性1型糖尿病模型(文献参考)
- Age
- 6–14 周龄(来源研究的纵向评定时段)
- Sex
- Female
- Tissue
- blood
- STZ 诱导糖尿病模型
- Sex
- Male
- Tissue
- blood
- ob/ob (Lep^ob)
- Age
- 5、10、20、40 周龄(来源研究的系列评定时点)
- Tissue
- blood
- CC G×E 多品系队列 (NZO 背景)
- Age
- 实验第6与第12周(该研究自8周龄起始)
- Sex
- Mixed
- Tissue
- blood
- 饮食诱导肥胖(DIO)模型(文献参考)
- Tissue
- blood
- db/db (Lepr^db)
- Tissue
- blood
- 饮食诱导肥胖(DIO)模型(文献参考)
- Age
- 饮食干预第 4、12、20 周
- Sex
- Mixed
- Tissue
- blood
- ZnT8 (Slc30a8) systemic knockout mouse
- Tissue
- blood
- beta cell-specific Tcf7l2 knockout mouse (RIP2.Cre-ER T2, tamoxifen-inducible)
- Tissue
- blood
- beta cell-specific ZnT8 knockout mouse (RIP2 promoter)
- Tissue
- blood
- High-fat diet-fed C57BL/6J mouse
- Age
- as reported in cited studies
- Tissue
- blood
Reagents and materials
Procedure
提前一周单笼饲养
实验前一周将小鼠改为单笼饲养。
称量体重
逐只称量小鼠体重,用于按体重计算给糖体积。
禁食6小时
禁食六小时(06:00:00)。
测定基线血糖
禁食结束后,先用血糖仪测定血糖作为基线。
腹腔注射葡萄糖
按2 g/kg体重腹腔注射葡萄糖:将2 g D-葡萄糖溶于10 ml生理盐水配成20%葡萄糖贮备液,按每克体重10 ul给予。
系列采血测定血糖
于注射葡萄糖后15、30、45、60、90和120分钟采集血样,用血糖仪测定血糖。
Quality control and readouts
负荷液须按源配方配制:2 g D-葡萄糖溶于10 mL生理盐水得20%(w/v),按每克体重10 µL给予以达到2 g/kg剂量。注射前须先测定基线血糖。采血时间点严格为注射后15、30、45、60、90和120分钟,并全程记录完整血糖-时间曲线。禁食时长(6小时)与检测时段应保持各受试对象一致。
以血糖浓度对时间作图得到完整血糖-时间曲线,并可计算曲线下面积(AUC)反映葡萄糖清除程度;当各受试对象基线血糖不同时应比较高于基线的幅度或曲线下面积,而非仅比较单一终点值。该检测反映葡萄糖负荷后的整体清除,不等同于胰岛素作用的直接测量。
References
- Roberta Marongiu, Sabina Marciano. Glucose Tolerance Test, Version 2. protocols.io record 98408, 2024-04-18. https://doi.org/10.17504/protocols.io.261geddodv47/v2
- Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice. Disease Models & Mechanism (2010), PMID 20713647, DOI 10.1242/dmm.006239