DMH诱导结直肠癌大鼠模型（文献参考）

1,2-二甲基肼（DMH）诱导的大鼠结直肠癌发生模型。文献描述 aberrant crypt foci（ACF）为结肠中最早可识别的癌前病变，已广泛用作短期化学预防研究中的生物标志物。该模型在啮齿类动物结直肠癌研究中应用广泛，但其表现高度依赖于方案设计。较高剂量的短期给药方案倾向于早期病变诱导，而较低剂量的长期给药方案更常允许进展至更晚期病理改变。

结局指标

获得可供光学显微镜观察的 H&E 染色组织切片：细胞核蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维粉红色，用于观察组织中细胞的整体结构与形态细节。本方案本身不产出病理评分数值，也不提供特定分子标志物的定量结果。

实验动物

Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology

年龄: 产后 53 日(PMID:30370256)
组织: colon

实验步骤

脱蜡（Dewaxing）石蜡切片置于二甲苯中脱蜡 3 次，每次 00:03:00。复水（Rehydration）石蜡切片依次置于 100% 乙醇中 3 次、每次 00:03:00，再置于 95% 乙醇中 1 次、00:03:00，随后用水漂洗。苏木素核染色（Hematoxylin staining）石蜡切片以苏木素染液染色 00:00:20，随后在流水下冲洗 00:01:00。分化与返蓝（Differentiation and bluing）石蜡切片置于返蓝液中 00:01:00，随后在流水下冲洗 00:01:00；此步使细胞核呈现蓝色。伊红染色（Eosin staining）石蜡切片以伊红复染 00:00:10；此步使细胞质成分与结缔组织纤维呈现粉红色。脱水与透明（Dehydration and Clearing）石蜡切片依次置于 95% 乙醇中 00:02:00、100% 乙醇中 2 次、每次 00:02:00，随后置于二甲苯中 2 次、每次 00:02:00。封片（Mounting）石蜡切片以 Permount 封片介质加盖玻片封固。

模型身份

模型名称: DMH诱导结直肠癌大鼠模型（文献参考）
物种: rat
NCBI Taxonomy ID: 10116
品系: Wistar

生物学特性

表型出现阶段: 早期病变（ACF）至晚期肿瘤
适用研究问题: 表征ACF作为DMH诱导癌发生中的早期读数；综合DMH诱导大鼠结直肠癌发生的证据并确定标准化方案；比较DMH给药途径以提高方案重现性；推荐针对早期（ACF）或晚期（肿瘤）终点的两种标准化DMH方案。
模型局限: 文献参考模型，不代表公司实际保有、供应或质检。本包内无原研实际使用，依据为综述归纳。该模型存在显著的方案敏感性，不同研究在给药方案和实验设计方面存在实质性差异，限制了研究间的一致性。皮下给药在方案重现性方面仍是最合理的选择，而非探索途径特异性生物学。研究主要使用雄性Wistar大鼠（总体62.3%为Wistar；77.7%为仅雄性设计），限制了研究结果对雌性动物和其他品系的可推广性。

实验方法

组织学分析

实验方案

Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology
本方案用于固定、石蜡包埋组织切片（4 μm）的苏木素-伊红（H&E）染色：经脱蜡、复水、苏木素核染、返蓝、伊红复染、脱水透明与封片七个步骤，使细胞核呈蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维呈粉红色，供光学显微镜下观察组织中细胞与整体结构形态。

配套试剂与材料

组织学二甲苯（混合异构体）
脱蜡剂
Ethanol
复水梯度溶剂（去除二甲苯）
95% 乙醇溶液
复水梯度溶剂
自来水（组织学染色用）
复水后漂洗用水（后续各流水冲洗共用）
Epredia Signature Series 苏木素染液（7221）
细胞核染色
Epredia Signature Series 返蓝液（7301）
返蓝（使细胞核转蓝）
Epredia Signature Series 伊红 Y 染液（7111）
细胞质与结缔组织纤维复染
Permount 组织学封片剂（Fisher SP15）
封片介质

参考文献

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