鼻内 OVA+LPS 嗜中性粒细胞性气道炎症模型(C57BL/6,文献参考)
连续三日鼻内给予 OVA(100 μg)+LPS(Eisenbarth 方案):肺 Th2("Th2pathic")细胞群扩增,甲基胆碱 25/50 mg/mL 时 OVA-LPS 组气道反应较 OVA 组显著升高,为嗜中性/混合型气道炎症范式。
结局指标
获得可供光学显微镜观察的 H&E 染色组织切片:细胞核蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维粉红色,用于观察组织中细胞的整体结构与形态细节。本方案本身不产出病理评分数值,也不提供特定分子标志物的定量结果。
实验动物
鼻内 OVA+LPS 嗜中性粒细胞性气道炎症模型(C57BL/6,文献参考)
- 年龄
- not reported in source; ex-vivo endpoint-collected fixed tissue section, HE readout
- 组织
- lung
鼻内 OVA+LPS 嗜中性粒细胞性气道炎症模型(C57BL/6,文献参考)
- 年龄
- 未记载周龄,终点取材组织切片 HE 判读(离体)
- 组织
- lung
实验步骤
脱蜡(Dewaxing) 石蜡切片置于二甲苯中脱蜡 3 次,每次 00:03:00。 复水(Rehydration) 石蜡切片依次置于 100% 乙醇中 3 次、每次 00:03:00,再置于 95% 乙醇中 1 次、00:03:00,随后用水漂洗。 苏木素核染色(Hematoxylin staining) 石蜡切片以苏木素染液染色 00:00:20,随后在流水下冲洗 00:01:00。 分化与返蓝(Differentiation and bluing) 石蜡切片置于返蓝液中 00:01:00,随后在流水下冲洗 00:01:00;此步使细胞核呈现蓝色。 伊红染色(Eosin staining) 石蜡切片以伊红复染 00:00:10;此步使细胞质成分与结缔组织纤维呈现粉红色。 脱水与透明(Dehydration and Clearing) 石蜡切片依次置于 95% 乙醇中 00:02:00、100% 乙醇中 2 次、每次 00:02:00,随后置于二甲苯中 2 次、每次 00:02:00。 封片(Mounting) 石蜡切片以 Permount 封片介质加盖玻片封固。
模型身份
- 模型名称
- 鼻内 OVA+LPS 嗜中性粒细胞性气道炎症模型(C57BL/6,文献参考)
- 物种
- mouse
- NCBI Taxonomy ID
- 10090
- 品系
- C57BL/6
生物学特性
- 适用研究问题
- LPS 佐剂条件下气道中性粒细胞炎症与 AHR 机制。
- 模型局限
- 文献参考模型,不代表公司实际保有、供应或质检;非经典铝佐剂 Th2 路径;与 OVA/alum 模型不可互换表述。
实验方法
实验方案
- Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology
本方案用于固定、石蜡包埋组织切片(4 μm)的苏木素-伊红(H&E)染色:经脱蜡、复水、苏木素核染、返蓝、伊红复染、脱水透明与封片七个步骤,使细胞核呈蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维呈粉红色,供光学显微镜下观察组织中细胞与整体结构形态。
配套试剂与材料
- 组织学二甲苯(混合异构体)
脱蜡剂
- Ethanol
复水梯度溶剂(去除二甲苯)
- 95% 乙醇溶液
复水梯度溶剂
- 自来水(组织学染色用)
复水后漂洗用水(后续各流水冲洗共用)
- Epredia Signature Series 苏木素染液(7221)
细胞核染色
- Epredia Signature Series 返蓝液(7301)
返蓝(使细胞核转蓝)
- Epredia Signature Series 伊红 Y 染液(7111)
细胞质与结缔组织纤维复染
- Permount 组织学封片剂(Fisher SP15)
封片介质
参考文献
- Fink Marc Y, Qi Xiulan, Shirey Kari Ann, Fanaroff Rachel, Chapoval Svetlana, Viscardi Rose M. Mice Expressing Cosegregating Single Nucleotide Polymorphisms (D298G and N397I) in TLR4 Have Enhanced Responses to House Dust Mite Allergen.. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950). 2022; PMID: 35396219
- Whitehead Gregory S, Nakano Keiko, Wilkinson Christina L, Patterson Antonio M, Upadhyay Sandeep, Massri Abdull J. Urokinase plasminogen activator receptor attenuates allergen-induced eosinophil migration and airway hyperresponsiveness.. American journal of respiratory cell and molecular biology. 2026; PMID: 41134983
- Hu Hang, Wang Xing, Guo Linlin, Zeng Ziling, Tang Hongmei, Zhang Yun. α‑Cyperone targets the PAK1‑JNK/NF‑κB axis to modulate dendritic cells maturation and Th2/Th9 differentiation in an asthma model.. International journal of molecular medicine. 2026; PMID: 42596835
- Nathalia L. Oliveira; Samantha Gruenheid. Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology. protocols.io, v1, 2026-07-31. DOI: 10.17504/protocols.io.kxygxr9jdg8j
- Epredia Signature Series Hematoxylin (7221), 产品信息页, Fisher Scientific
- Epredia Signature Series Bluing Reagent (7301), 产品信息页, Fisher Scientific
- Epredia Signature Series Eosin Y (7111), 产品信息页, Fisher Scientific
- Xylene, Fisherbrand HistoPrep (HC7001GAL), 产品信息页, Fisher Scientific
- Fisher Chemical Permount Mounting Medium (SP15 产品族), 产品信息页, Fisher Scientific
- Ethanol (CID 702, CAS 64-17-5), PubChem 化合物标准记录
- ARRIVE 2.0 官方规范