链格孢 Alternaria 鼻内激发气道炎症模型(文献参考)
单次/反复鼻内给予 A. alternata 提取物(如 100 μg/40 μL PBS)诱导固有型 Th2 气道炎症:BALF IL-5/IL-13 变化与 ILC2(CD45+CD4−Lin−CD127+CD90.2+CD25+)募集,伴嗜酸粒细胞浸润与 AHR。
结局指标
获得可供光学显微镜观察的 H&E 染色组织切片:细胞核蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维粉红色,用于观察组织中细胞的整体结构与形态细节。本方案本身不产出病理评分数值,也不提供特定分子标志物的定量结果。
实验动物
链格孢 Alternaria 鼻内激发气道炎症模型(文献参考)
- 年龄
- not reported in source; ex-vivo endpoint-collected fixed tissue section, HE readout
- 组织
- lung
链格孢 Alternaria 鼻内激发气道炎症模型(文献参考)
- 年龄
- 未记载周龄,终点取材组织切片 HE 判读(离体)
- 组织
- lung
实验步骤
脱蜡(Dewaxing) 石蜡切片置于二甲苯中脱蜡 3 次,每次 00:03:00。 复水(Rehydration) 石蜡切片依次置于 100% 乙醇中 3 次、每次 00:03:00,再置于 95% 乙醇中 1 次、00:03:00,随后用水漂洗。 苏木素核染色(Hematoxylin staining) 石蜡切片以苏木素染液染色 00:00:20,随后在流水下冲洗 00:01:00。 分化与返蓝(Differentiation and bluing) 石蜡切片置于返蓝液中 00:01:00,随后在流水下冲洗 00:01:00;此步使细胞核呈现蓝色。 伊红染色(Eosin staining) 石蜡切片以伊红复染 00:00:10;此步使细胞质成分与结缔组织纤维呈现粉红色。 脱水与透明(Dehydration and Clearing) 石蜡切片依次置于 95% 乙醇中 00:02:00、100% 乙醇中 2 次、每次 00:02:00,随后置于二甲苯中 2 次、每次 00:02:00。 封片(Mounting) 石蜡切片以 Permount 封片介质加盖玻片封固。
模型身份
- 模型名称
- 链格孢 Alternaria 鼻内激发气道炎症模型(文献参考)
- 物种
- mouse
- NCBI Taxonomy ID
- 10090
生物学特性
- 适用研究问题
- 蛋白酶活性真菌过敏原驱动的 ILC2/固有免疫气道炎症。
- 模型局限
- 文献参考模型,不代表公司实际保有、供应或质检;品系因研究而异(含免疫健全与细胞因子受体修饰品系),不指定单一背景。
实验方法
实验方案
- Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology
本方案用于固定、石蜡包埋组织切片(4 μm)的苏木素-伊红(H&E)染色:经脱蜡、复水、苏木素核染、返蓝、伊红复染、脱水透明与封片七个步骤,使细胞核呈蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维呈粉红色,供光学显微镜下观察组织中细胞与整体结构形态。
配套试剂与材料
- 组织学二甲苯(混合异构体)
脱蜡剂
- Ethanol
复水梯度溶剂(去除二甲苯)
- 95% 乙醇溶液
复水梯度溶剂
- 自来水(组织学染色用)
复水后漂洗用水(后续各流水冲洗共用)
- Epredia Signature Series 苏木素染液(7221)
细胞核染色
- Epredia Signature Series 返蓝液(7301)
返蓝(使细胞核转蓝)
- Epredia Signature Series 伊红 Y 染液(7111)
细胞质与结缔组织纤维复染
- Permount 组织学封片剂(Fisher SP15)
封片介质
参考文献
- Zhang Xiaogang, Chen Ziyang, Zuo Shaowen, Sun Hengbiao, Li Xinyao, Lu Xiao. Endothelin-A Receptor Antagonist Alleviates Allergic Airway Inflammation via the Inhibition of ILC2 Function.. Frontiers in immunology. 2022; PMID: 35222426
- Schmitt Pauline, Duval Anais, Camus Mylène, Lefrançais Emma, Roga Stéphane, Dedieu Cécile. TL1A is an epithelial alarmin that cooperates with IL-33 for initiation of allergic airway inflammation.. The Journal of experimental medicine. 2024; PMID: 38597952
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- Epredia Signature Series Hematoxylin (7221), 产品信息页, Fisher Scientific
- Epredia Signature Series Bluing Reagent (7301), 产品信息页, Fisher Scientific
- Epredia Signature Series Eosin Y (7111), 产品信息页, Fisher Scientific
- Xylene, Fisherbrand HistoPrep (HC7001GAL), 产品信息页, Fisher Scientific
- Fisher Chemical Permount Mounting Medium (SP15 产品族), 产品信息页, Fisher Scientific
- Ethanol (CID 702, CAS 64-17-5), PubChem 化合物标准记录
- ARRIVE 2.0 官方规范