Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology
Browse experimental protocolsHematoxylin and eosin (H&E) staining of fixed, paraffin-embedded tissue sections (4 μm). The workflow covers dewaxing, rehydration, hematoxylin nuclear staining, bluing, eosin counterstaining, dehydration and clearing, and coverslipping, yielding blue-purple nuclei and pink cytoplasm and connective tissue fibers for light-microscopic assessment of cellular and tissue morphology.
Scope and method
Sample：固定、石蜡包埋组织切片（4 μm，载于玻片）
- 高脂高果糖饮食诱导代谢综合征模型（C57BL/6 小鼠）
- Age
- 16 周饮食后
- Sex
- Male
- Tissue
- liver
- GALT 缺失经典半乳糖血症模型（SD 大鼠）
- Age
- 8–60 日龄（来源研究取材时点）
- Sex
- Mixed
- Tissue
- liver and brain
- CDAHFD 饮食诱导 NASH 模型（C57BL/6J 小鼠）
- Age
- 6 周 CDAHFD 喂养后
- Sex
- Male
- Tissue
- liver
- high-fat diet plus low-dose streptozotocin-induced type 2 diabetes C57BL/6J mouse
- Age
- 来源研究取样周龄
- Tissue
- liver
- db/db (Lepr^db)
- Age
- 来源研究取样周龄
- Tissue
- liver
- ob/ob (Lep^ob)
- Age
- 来源研究取样周龄
- Tissue
- liver
- High-fat diet-fed C57BL/6 mouse
- Age
- 16 周饮食后
- Sex
- Male
- Tissue
- liver
- OVA 致敏激发过敏性气道炎症模型（文献参考）
- Age
- 来源未报告周龄（体重 14.9–17.3 g）
- Sex
- Female
- Tissue
- lung（肺，含主支气管）
- Il10 基因缺失自发性结肠炎模型（文献参考）
- Age
- 6、10、16 周龄（来源观察时点）
- Tissue
- colon（结肠；来源同时观察小肠各段）
- TNBS 相关结肠炎模型（大鼠，文献参考）
- Age
- 成年（体重 180–230 g；来源未报告周龄）
- Sex
- Male
- Tissue
- colon（结肠）
- AOM/DSS 结肠炎相关结肠肿瘤模型（文献参考）
- Age
- 8–12 周龄（AOM 给药开始时）
- Tissue
- colon（结肠，含远端结肠肿瘤）
- DSS 诱导结肠炎模型
- Age
- 10 周龄（2.5% DSS 饮水 5 天，随后恢复 5 天）
- Sex
- Male
- Tissue
- colon（结肠，Swiss roll）
- CC011 自发性慢性结肠炎
- Age
- 12–60 周龄（CC011 表型队列）
- Tissue
- colon（结肠）
- GAN 饮食相关 MASH 模型（文献参考）
- Age
- 开始喂饲时5–6周龄；GAN饮食喂饲最长58周
- Tissue
- liver（肝）
- MC38 同系移植瘤模型（C57BL/6，文献参考）
- Age
- 8–10 周龄
- Sex
- Female
- Tissue
- tumor（MC38wt 皮下移植瘤）
- 屋尘螨暴露过敏性气道炎症模型（文献参考）
- Age
- 8–10 周龄
- Sex
- Female
- Tissue
- lung（肺）
- AMLN 饮食相关 MASH 模型（文献参考）
- Age
- AMLN饮食喂饲14、22、28周时点（自6周龄起喂饲）
- Sex
- Male
- Tissue
- liver（肝）
Reagents and materials
Procedure
脱蜡（Dewaxing）
石蜡切片置于二甲苯中脱蜡 3 次，每次 00:03:00。
复水（Rehydration）
石蜡切片依次置于 100% 乙醇中 3 次、每次 00:03:00，再置于 95% 乙醇中 1 次、00:03:00，随后用水漂洗。
苏木素核染色（Hematoxylin staining）
石蜡切片以苏木素染液染色 00:00:20，随后在流水下冲洗 00:01:00。
分化与返蓝（Differentiation and bluing）
石蜡切片置于返蓝液中 00:01:00，随后在流水下冲洗 00:01:00；此步使细胞核呈现蓝色。
伊红染色（Eosin staining）
石蜡切片以伊红复染 00:00:10；此步使细胞质成分与结缔组织纤维呈现粉红色。
脱水与透明（Dehydration and Clearing）
石蜡切片依次置于 95% 乙醇中 00:02:00、100% 乙醇中 2 次、每次 00:02:00，随后置于二甲苯中 2 次、每次 00:02:00。
封片（Mounting）
石蜡切片以 Permount 封片介质加盖玻片封固。
Quality control and readouts
返蓝步骤后细胞核应显蓝色；伊红复染后细胞质成分与结缔组织纤维应显粉红色；经脱水与透明后切片应透明、适于光镜观察，细胞与组织结构形态清晰可辨。
获得可供光学显微镜观察的 H&E 染色组织切片：细胞核蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维粉红色，用于观察组织中细胞的整体结构与形态细节。本方案本身不产出病理评分数值，也不提供特定分子标志物的定量结果。
References
- Nathalia L. Oliveira; Samantha Gruenheid. Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology. protocols.io, v1, 2026-07-31. DOI: 10.17504/protocols.io.kxygxr9jdg8j
- Epredia Signature Series Hematoxylin (7221), 产品信息页, Fisher Scientific
- Epredia Signature Series Bluing Reagent (7301), 产品信息页, Fisher Scientific
- Epredia Signature Series Eosin Y (7111), 产品信息页, Fisher Scientific
- Xylene, Fisherbrand HistoPrep (HC7001GAL), 产品信息页, Fisher Scientific
- Fisher Chemical Permount Mounting Medium (SP15 产品族), 产品信息页, Fisher Scientific
- Ethanol (CID 702, CAS 64-17-5), PubChem 化合物标准记录