Hematoxylin and Eosin (H&E) staining for histopathology

本方案用于固定、石蜡包埋组织切片（4 μm）的苏木素-伊红（H&E）染色：经脱蜡、复水、苏木素核染、返蓝、伊红复染、脱水透明与封片七个步骤，使细胞核呈蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维呈粉红色，供光学显微镜下观察组织中细胞与整体结构形态。

适用范围与方法

样本：固定、石蜡包埋组织切片（4 μm，载于玻片）

脱蜡（Dewaxing）
石蜡切片置于二甲苯中脱蜡 3 次，每次 00:03:00。
复水（Rehydration）
石蜡切片依次置于 100% 乙醇中 3 次、每次 00:03:00，再置于 95% 乙醇中 1 次、00:03:00，随后用水漂洗。
苏木素核染色（Hematoxylin staining）
石蜡切片以苏木素染液染色 00:00:20，随后在流水下冲洗 00:01:00。
分化与返蓝（Differentiation and bluing）
石蜡切片置于返蓝液中 00:01:00，随后在流水下冲洗 00:01:00；此步使细胞核呈现蓝色。
伊红染色（Eosin staining）
石蜡切片以伊红复染 00:00:10；此步使细胞质成分与结缔组织纤维呈现粉红色。
脱水与透明（Dehydration and Clearing）
石蜡切片依次置于 95% 乙醇中 00:02:00、100% 乙醇中 2 次、每次 00:02:00，随后置于二甲苯中 2 次、每次 00:02:00。
封片（Mounting）
石蜡切片以 Permount 封片介质加盖玻片封固。

返蓝步骤后细胞核应显蓝色；伊红复染后细胞质成分与结缔组织纤维应显粉红色；经脱水与透明后切片应透明、适于光镜观察，细胞与组织结构形态清晰可辨。

获得可供光学显微镜观察的 H&E 染色组织切片：细胞核蓝紫色、细胞质与结缔组织纤维粉红色，用于观察组织中细胞的整体结构与形态细节。本方案本身不产出病理评分数值，也不提供特定分子标志物的定量结果。